近年来，随着我国畜牧养殖业的快速发展，甘露聚糖酶作为第三代饲料酶成为了研究的热点。

在复合污染土壤的洗脱过程中，Cu依然表现为前30 min快速洗脱，30 min后慢速洗脱的特征，而BDE209则是4 h前慢速洗脱，4 h后快速洗脱，6 h后趋于平衡，Cu和BDE209的最高洗脱率分别为73.20%和40.57%。Cu2+能与LED3A分子中的羧基螯合成键，并与含氮含硫等基团通过形成配合物、电荷转移、静电反应等作用促进胶束形成，使LED3A分子聚合体内部结构重组。

Cu2+影响表面活性剂LED3A对有机物BDE209的增溶能力主要是通过改变LED3A分子结构实现。刁静茹110利用N-十二酰基乙二胺三乙酸钠盐(LED3A)洗脱重金属-多环芳烃(PAHs)复合污染土壤，结果表明LED3A可同时洗脱土壤中的Cu和菲，且两者同步洗脱率均可超过60%。随着信息科技的高速发展和电子产品的更新换代，越来越多的电子产品被淘汰、丢弃而成为电子废物。收集洗脱液，经旋转蒸发、氮吹浓缩后定容至2 mL。Cu2+与LED3A中的羧基结合后，降低了LED3A的负电荷，Zeta电位升高，分子间静电斥力降低，分子之间易于聚合形成更大的分子，促进胶束的形成，有利于LED3A对BDE209的增溶。

1 材料与方法1.1 试剂与仪器主要试剂包括LED3A(纯度90%)、BDE209(纯度95%)、硝酸铜(分析纯)、甲苯(优级纯)。冷冻干燥土壤与无水硫酸钠充分混匀后加入回收率指示物13C-BDE209，40 mL甲苯在BUCHI抽提系统(B-811)中提取8 h(加入铜粉除硫)。步骤2发酵液稀释150～500倍数，用离心机3500r/min离心10min，得到样品上清液。

对比因变量OD峰值、峰值周期、产酸质量浓度、转化率，最终确定磷酸甜菜碱在赖氨酸发酵底料中最佳用量。1.3.2发酵液中赖氨酸质量浓度的测定赖氨酸质量浓度采用茚三酮显色法测定。赵琳琳在脱氮假单胞菌产VB12发酵过程中甜菜碱作用机理及其补料策略的研究中介绍了甜菜碱在发酵过程中作用机理，甲基参与合成甲硫氨酸、VB12和丙氨酸等多种物质，并指出甜菜碱分子中含有3个甲基，是高效的甲基供体，还得出甜菜碱质量浓度在2～3g/L时菌浓增加了10.5%，VB12产量增加了23.8%的结论。目前，大多数企业在赖氨酸发酵配方中添加一定量的氯化胆碱起到调节渗透压、提供甲基化反应的甲基的作用，但氯化胆碱中氯离子对设备腐蚀性严重。

步骤4在Excel中以赖氨酸盐酸盐标样质量浓度为纵坐标，吸光值为横坐标绘制标准曲线，得出标准曲线公式，再将样品吸光值代入标准曲线公式中计算出发酵液中赖氨酸质量浓度。在医疗方面应用非常广泛，比如防治骨质疏松症，提高机体的免疫功能和对传染病的抗病能力，又如赖谷复合盐用于治疗慢性脑组织缺血、颅脑外伤病及缺氧性疾病的脑保护，还可以用于治疗单纯疱疹病毒和带状疱疹引起的唇疱疹等。

1.3分析测定方法1.3.1OD值检测方法取1mL发酵液，用100mL容量瓶稀释100倍，使用720型分光光度计在600nm波长下检测OD值。p表示自变量对因变量影响大小的显著度，当p0.05时表示影响不显著或无统计学意义，当0.01p0.05时表示影响显著，当p0.01时表示影响极其显著。1.1.2实验配方三级种子基础配方：MnSO4质量2kg，FeSO4质量2kg，KH2PO4质量60kg，K2HPO4质量60kg，(NH4)2SO4质量250kg，MgSO4质量30kg，玉米浆体积2.0m3，消泡油质量6kg，铜锌质量适量，定容体积35m3。发酵底料基础配方：MnSO4质量25kg，FeSO4质量25kg，KH2PO4质量160kg，K2HPO4质量160kg，H3PO4质量100kg，(NH4)2SO4质量800kg，MgSO4质量250kg，玉米浆体积5.0m3，消泡油质量200kg，铜锌质量适量，定容体积240m3。

1.2实验设计在现有三级种子基础配方上分别用质量浓度0.3，0.5，0.7，0.9g/L的磷酸甜菜碱替代氯化胆碱，定容30m3，接种量体积为1500L，OD为0.5的二级种子液，培养温度30℃，PH实测6.95，溶氧控制30%，初糖流加量均不变，在成熟净OD均为0.45的情况下对比成熟周期，确定成熟周期最短时磷酸甜菜碱的用量即为最佳用量。相比之下磷酸甜菜碱价格上涨幅度较小。常立群等发现在谷氨酸发酵中添加适量甜菜碱可提高谷氨酸产酸。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除相关链接：氨基酸，甲硫氨酸，磷酸盐。

2)采用SPSS软件设计影响磷酸甜菜碱流加因素的正交实验，并对实验结果做方差分析，确定最佳流加条件。L-赖氨酸是人类和动物所必需八大氨基酸之一。

甜菜碱作为发酵促进剂在氨基酸发酵中应用的研究很多，总结其主要功能包括两点：1)维持和调节细胞渗透压。在现有发酵底料基础配方、定容体积、接种量、培养温度(37℃)、PH实测7.0、溶氧控制30%、初糖质量浓度0.02g/L、发酵过程残糖质量浓度控制6.0g/L、NH+4质量浓度控制2.0～4.0g/L，其他因素均不变的情况下，设计用磷酸甜菜碱替代氯化胆碱的单因素多水平实验，添加质量浓度分别为0.3，0.5，0.7，0.9g/L。

当外界渗透压发生剧烈变化时，细胞吸收或合成的甜菜碱通过稳定蛋白质结构、提高钾钠泵功能和阻止胞内水分丢失等方式增加细胞对渗透压的抗性。1.1.3实验设备体积为2500L的二级种子培养罐，5000L的三级种子培养罐，47000L的发酵罐，20000L配料罐，三级种子连消系统，底料连消系统，浓糖连消系统，硫铵连消系统，浓糖流加罐，硫铵流加罐，720型紫外分光光度计，100mL容量瓶，0～1000mL移液枪，1mL移液管，吸耳球，洗瓶等。步骤1用赖氨酸标样配置质量浓度为10g/L赖氨酸盐酸盐标液，分别取2，3，4，5，6mL赖氨酸盐酸盐标液至100mL容量瓶中，用去离子水定容至100mL，得到质量浓度分别为0.2，0.3，0.4，0.5，0.6g/L的赖氨酸盐酸盐标样。因此，笔者继续实验了磷酸甜菜碱替代氯化胆碱在赖氨酸发酵中的应用，可为提高赖氨酸发酵指标、降低生产成本提供方向1.3分析测定方法1.3.1OD值检测方法取1mL发酵液，用100mL容量瓶稀释100倍，使用720型分光光度计在600nm波长下检测OD值。目前，大多数企业在赖氨酸发酵配方中添加一定量的氯化胆碱起到调节渗透压、提供甲基化反应的甲基的作用，但氯化胆碱中氯离子对设备腐蚀性严重。

黄登高等在研究乳酸发酵时发现，甜菜碱能够提高高糖浓度下乳酸菌的细胞生长速率和乳酸脱氢酶的活力，进而提高乳酸产量。相比之下磷酸甜菜碱价格上涨幅度较小。

1.3.2发酵液中赖氨酸质量浓度的测定赖氨酸质量浓度采用茚三酮显色法测定。甜菜碱作为发酵促进剂在氨基酸发酵中应用的研究很多，总结其主要功能包括两点：1)维持和调节细胞渗透压。

在现有总氮配方基础上添加磷酸甜菜碱，设计起始流加时间、总氮中磷酸甜菜碱添加浓度、糖氮比(浓糖与总氮的流加体积比)的三因素多水平正交实验，对比转化率得出最佳添加质量浓度、流加起始时间和糖氮体积比。中国饲料行业信息网报道，市场上质量分数为21%的氯化胆碱价格逐年上涨，2016年均价5400元/吨，2017年涨至6319.5元/吨，2018年涨至15000元/吨，已经造成赖氨酸发酵成本上升10元/吨理论酸，而磷酸甜菜碱市场价格2016年为9600元/吨、2017年8952元/吨、2018年13500元/吨。

刘丽君在L-异亮氨酸产生菌的选育及发酵条件研究中介绍到，通过添加甜菜碱2.5g/L使得苏氨酸发酵周期缩短12h，L-异亮氨酸产量提高66.3%。当外界渗透压发生剧烈变化时，细胞吸收或合成的甜菜碱通过稳定蛋白质结构、提高钾钠泵功能和阻止胞内水分丢失等方式增加细胞对渗透压的抗性。统计方法分析结果中的F表示自变量对因变量的影响大小。p表示自变量对因变量影响大小的显著度，当p0.05时表示影响不显著或无统计学意义，当0.01p0.05时表示影响显著，当p0.01时表示影响极其显著。

1.1.2实验配方三级种子基础配方：MnSO4质量2kg，FeSO4质量2kg，KH2PO4质量60kg，K2HPO4质量60kg，(NH4)2SO4质量250kg，MgSO4质量30kg，玉米浆体积2.0m3，消泡油质量6kg，铜锌质量适量，定容体积35m3。发酵底料基础配方：MnSO4质量25kg，FeSO4质量25kg，KH2PO4质量160kg，K2HPO4质量160kg，H3PO4质量100kg，(NH4)2SO4质量800kg，MgSO4质量250kg，玉米浆体积5.0m3，消泡油质量200kg，铜锌质量适量，定容体积240m3。

常立群等发现在谷氨酸发酵中添加适量甜菜碱可提高谷氨酸产酸。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种伊品生物科技股份有限公司菌种中心提供赖氨酸生产用菌。

在现有发酵底料基础配方、定容体积、接种量、培养温度(37℃)、PH实测7.0、溶氧控制30%、初糖质量浓度0.02g/L、发酵过程残糖质量浓度控制6.0g/L、NH+4质量浓度控制2.0～4.0g/L，其他因素均不变的情况下，设计用磷酸甜菜碱替代氯化胆碱的单因素多水平实验，添加质量浓度分别为0.3，0.5，0.7，0.9g/L。2)采用SPSS软件设计影响磷酸甜菜碱流加因素的正交实验，并对实验结果做方差分析，确定最佳流加条件。

在医疗方面应用非常广泛，比如防治骨质疏松症，提高机体的免疫功能和对传染病的抗病能力，又如赖谷复合盐用于治疗慢性脑组织缺血、颅脑外伤病及缺氧性疾病的脑保护，还可以用于治疗单纯疱疹病毒和带状疱疹引起的唇疱疹等。磷酸甜菜碱是甜菜碱的磷酸盐，在赖氨酸发酵中应用研究较少。对比因变量OD峰值、峰值周期、产酸质量浓度、转化率，最终确定磷酸甜菜碱在赖氨酸发酵底料中最佳用量。步骤1用赖氨酸标样配置质量浓度为10g/L赖氨酸盐酸盐标液，分别取2，3，4，5，6mL赖氨酸盐酸盐标液至100mL容量瓶中，用去离子水定容至100mL，得到质量浓度分别为0.2，0.3，0.4，0.5，0.6g/L的赖氨酸盐酸盐标样。

1.2实验设计在现有三级种子基础配方上分别用质量浓度0.3，0.5，0.7，0.9g/L的磷酸甜菜碱替代氯化胆碱，定容30m3，接种量体积为1500L，OD为0.5的二级种子液，培养温度30℃，PH实测6.95，溶氧控制30%，初糖流加量均不变，在成熟净OD均为0.45的情况下对比成熟周期，确定成熟周期最短时磷酸甜菜碱的用量即为最佳用量。如何提高赖氨酸发酵糖酸转化率、降低设备腐蚀，是降低生产成本提高企业竞争力的关键点。

步骤2发酵液稀释150～500倍数，用离心机3500r/min离心10min，得到样品上清液。总氮基础配方：MnSO4质量20kg，FeSO4质量20kg，KH2PO4质量250kg，K2HPO4质量250kg，MgSO4质量500kg，消泡油质量100kg，定容体积30m3。

声明：本文所用图片、文字来源《分析仪器》，版权归原作者所有。赵琳琳在脱氮假单胞菌产VB12发酵过程中甜菜碱作用机理及其补料策略的研究中介绍了甜菜碱在发酵过程中作用机理，甲基参与合成甲硫氨酸、VB12和丙氨酸等多种物质，并指出甜菜碱分子中含有3个甲基，是高效的甲基供体，还得出甜菜碱质量浓度在2～3g/L时菌浓增加了10.5%，VB12产量增加了23.8%的结论。